常用的分离分析工具液相色谱仪在实验室中,正确操作不但关乎实验结果准确性,而且直接影响仪器寿命,经过多年实践概括出一套标准化操作流程以及关键性注意事项,这些经验对保证检测质量是至关重要的。
液相色谱仪如何正确开机和准备
开机之前,要检查流动相瓶液位,还要检查流动相瓶纯度,以此确保溶剂足量,并且确保溶剂没有污染。要按照仪器、工作站、模块这样的顺序依次启动,等待系统自检完成之后,再进行管路冲洗。特别需要注意的是,流动相必须经过滤处理,流动相还必须经过脱气处理,要避免杂质堵塞色谱柱,也要避免气泡影响检测器基线稳定性。每次更换流动相体系的时候,需保留足够平衡时间,通常情况下,反相色谱需要30分钟以上。
液相色谱方法如何设置参数
设置方法参数时,应依据化合物性质以及分离需求来进行,流速通常被设置在了1.0 mL/min,柱温箱的温度是要根椐样品稳定性去调整的,一般情况下维持在30-40℃,检测器波长需要与待测物最大吸收波长相匹配,进样量是按照浓度来选择5-20 μL的,梯度洗脱程序要实现平稳过渡,防止压力出现剧烈波动,所有参数设置完毕之后应保存方法文件,方便后续调用以及追溯。

液相色谱样品如何处理和进样
针对样品前处理,必须将颗粒物予以去除,一般会运用0.22μm或者0.45μm的滤膜来进行过滤。在进样之前,需要借助流动相或者初始比例的溶剂进行溶剂来进行溶解,以此避免因溶剂效应致使峰形发生畸变。当使用自动进样器的时候,要保证进样针能够得到充分清洗,进而防止出现交叉污染的情况。对于手动进样而言,应当留意定量环的充满程度,通过采用完全注满的方式能够确保进样体积的精确性。对于高浓度样品,应当进行适当稀释,以此避免柱体出现超载现象。
液相色谱日常维护要注意什么
每日使用过后,要用适当的溶剂冲洗系统,用该溶剂冲洗色谱柱,反相色谱柱最后要保存在甲醇里,或者保存在乙腈中。每周要检查泵密封垫,每周还要检查排气阀,每月要清洗检测器流通池。发现压力异常升高的时候,就得马上排查过滤头是不是堵塞了,还要排查色谱柱是不是堵塞了。长期不使用的仪器需要定期开机运行,以此防止阀件卡滞。所有的维护操作都应该记录在仪器使用日志当中。
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